提高蔡司光學顯微鏡分辨率的方法有哪些?
分類:公司新聞 發布時間:2021-03-22 34842次瀏覽
顯微鏡作為檢測設備的主要設備之一,而評判顯微鏡性能的重要指標是分辨率。分辨率是指...
顯xian微wei鏡jing作zuo為wei檢jian測ce設she備bei的de主zhu要yao設she備bei之zhi一yi,而er評ping判pan顯xian微wei鏡jing性xing能neng的de重zhong要yao指zhi標biao是shi分fen辨bian率lv。分fen辨bian率lv是shi指zhi能neng清qing楚chu地di分fen辨bian兩liang個ge小xiao點dian或huo兩liang線xian間jian的de最zui小xiao距ju離li。人眼本身就是一台顯微鏡,在標準照明條件下,人眼在明視距離(國際公認為25cm) 上的分辨率約等於1/ 10mm。對於觀察兩條直線來說,由於直線能刺激一係列神經細胞,眼睛的分辨率還能提高一些。
人眼的分辨率隻有1/ 10mm, 那麼比1/ 10mm 小的物體或比1/ 10mm 近的兩個微小物體的距離,人眼就無法分辨了。所以出現了從簡單的宏觀放大鏡到微觀觀測的光學顯微鏡,繼而電子顯微鏡。顯微鏡的分辨率定義是指在標本上能清楚分辨的兩個小點之間的最小距離。其計算公式為:
D=0.61λ/NA
式中:D 為分辨率(um);λ 為光源波長(um);NA 為物鏡的數值口徑(也稱鏡口率)。
由公式可得到,顯微鏡的分辨率決定於入射光源的波長以及所匹配物鏡的數值孔徑。由此可知,提高光學顯微鏡的方法:
1、降低光源波長。
可見光最短波長為390nm,若用此波長的紫外光作為照明光源,可使光學顯微鏡的分辨率降低至0.2um。但是由於大多數普通材料的玻璃會大量吸收340nm以下波長的光,紫外光經過大量衰減無法形成清晰、明亮的圖像。因此不得不使用石英(可透過低達200nm的紫外光)、熒石(可透過低達185nm的紫外光)等(deng)價(jia)格(ge)昂(ang)貴(gui)的(de)材(cai)料(liao),並(bing)且(qie)紫(zi)外(wai)光(guang)顯(xian)微(wei)鏡(jing)不(bu)能(neng)用(yong)肉(rou)眼(yan)進(jin)行(xing)觀(guan)察(cha),甚(shen)至(zhi)受(shou)觀(guan)測(ce)樣(yang)品(pin)的(de)限(xian)製(zhi),再(zai)加(jia)上(shang)昂(ang)貴(gui)的(de)造(zao)價(jia),所(suo)以(yi)這(zhe)種(zhong)提(ti)高(gao)顯(xian)微(wei)鏡(jing)分(fen)辨(bian)率(lv)的(de)方(fang)式(shi)由(you)於(yu)其(qi)自(zi)身(shen)的(de)局(ju)限(xian)性(xing)而(er)不(bu)受(shou)廣(guang)泛(fan)應(ying)用(yong)。
2、增加物鏡的數值孔徑NA.
數值孔徑NA=n*sin(u)
式中,n為物鏡與標本之間的介質折射率;uweiwujingdeerfenzhiyikongjingjiao。yinci,congguangxueshejishangshidangcaiyongjiaodadekongjingjiao,huozhezengdazheshelvchengweizuichangjiandetigaoguangxuexianweijingfenbianlvdefangfa。yibandibeiwujingru10X以下其介質采用空氣,折射率為1,即幹燥係物鏡;水浸介質是蒸餾水,其折射率為1.33;油浸物鏡介質是香柏油或其它透明油,其折射率一般在1.52 左右,接近透鏡和載玻片的折光率,如Olympus 的100X油鏡。水浸物鏡和油浸物鏡不僅放大倍數高而且由於使用高折射率的介質,從而提高物鏡的分辨率。
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